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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠表皮成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
大鼠表皮成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：鋅指蛋白98抗體 磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 NADSYN1蛋白抗體 大鼠表皮成纖維 雞腎小管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：87
更新時(shí)間：2024-10-27
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠表皮成纖維細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7475 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠表皮成纖維分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人原卟啉原氧化酶(PPOX)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human PPOX (Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit
人堿性唾液脯酸豐富蛋白1(PRB1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human PRB1 (Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit
人叉頭框蛋白C1(FOXC1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human FOXC1 (Forkhead Box Protein C1) ELISA Kit
人叉頭框蛋白O1(FOXO1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒
HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAkit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCystatinC,Cys-C檢測(cè)試劑盒人半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
HumanpodocinELISAKit人Podocin檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
嗅覺(jué)受體5AR1抗體
p21活化蛋白激酶ARHG7抗體
IL5重組狗 IL5 蛋白 Protein
OPG(Osteoprotegerin 0.5mgOPG(Osteoprotegerin) 護(hù)骨素(多肽抗原)
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
KCT2 Protein Human 重組人 KCT2 / C5orf15 蛋白
CNTF Protein Mouse 重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白
OPG(Osteoprotegerin 0.5mgOPG(Osteoprotegerin) 護(hù)骨素(多肽抗原)
KCT2 Protein Human 重組人 KCT2 / C5orf15 蛋白
IL5重組狗 IL5 蛋白 Protein
CNTF Protein Mouse 重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠表皮成纖維細(xì)胞豬褪黑素(MT/MLT)檢測(cè)試劑盒
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1 (TIMP-1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)檢測(cè)試劑盒
GuineaPiglipidperoxlde,LPOELISAKit 豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANKRD1(Humancardiacankyriepeatdomain1)ELISAKit人心肌錨蛋白重復(fù)域1
血液超氧化物陰離子比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit豬促胃液素受體(GsaR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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