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產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:90
更新時(shí)間:2024-10-27
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞
組織來(lái)源:脊髓組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠背根神經(jīng)元分離自脊椎背根神經(jīng)節(jié);感覺(jué)神經(jīng)母細(xì)胞發(fā)出軸突,呈束狀,左右對(duì)稱地從神經(jīng)管的背部進(jìn)入,此時(shí)的脊神經(jīng)節(jié)即改稱為背根神經(jīng)節(jié)。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細(xì)胞,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個(gè)有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動(dòng),突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓背根神經(jīng)節(jié)是周圍神經(jīng)的主要傳入神經(jīng)元,是感覺(jué)信號(hào)傳導(dǎo)的中繼站。背根神經(jīng)元細(xì)胞的獲取較為困難,需要在盡可能短的時(shí)間內(nèi)通過(guò)解剖顯微鏡獲得一定量的背根神經(jīng)節(jié)組織。神經(jīng)組織體外培養(yǎng)方法是當(dāng)代神經(jīng)科學(xué)一項(xiàng)很有價(jià)值的研究手段,背根神經(jīng)節(jié)富含周圍神經(jīng)系統(tǒng)感覺(jué)神經(jīng)元,已廣泛用于軸突的導(dǎo)向及再生、中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘形成、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子作用及受體分布、神經(jīng)細(xì)胞衰老機(jī)制、基因治療、組織工程等神經(jīng)科學(xué)的研究。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠背根神經(jīng)元采用膠原酶-聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠背根神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠心素(mouse ANP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(mouse AIF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠固(mouse ALD) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)檢測(cè)試劑盒
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit 人脂氧素A4(LXA4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1檢測(cè)試劑盒雞胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞DAPKINASE蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit小鼠顆粒酶A(Gzms-A)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
雄激素受體抗體
N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶11抗體
CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)
MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白 Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
CD3D重組小鼠 CD3d / CD3 delta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TGFBR2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TGFBR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MZB1重組人 MZB1 / PERP1 蛋白 Protein
大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒
People of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2(COX-2)檢測(cè)試劑盒
Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 兔型纖溶酶原激活物(uPA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAP13(Humanapelin13)ELISAKit人apelin13
血清樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒20次
PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit豬白介素18(IL-18)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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