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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:55
更新時間:2024-11-04
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠精原干細(xì)胞
組織來源:睪丸組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠精原干分離自睪丸組織;精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞,是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些優(yōu)勢使其成為動物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項(xiàng)生命活動的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究,發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染,異體、異種移植技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi),發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細(xì)胞(SSCs)一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細(xì)胞直至最后生成。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處,是哺乳動物發(fā)生的最原始細(xì)胞,也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠精原干采用先機(jī)械吹打、后消化,結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠精原干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
心肌轉(zhuǎn)錄因子 4(GATA4) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
中性粒細(xì)胞趨化蛋白 -2(GCP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍化營養(yǎng)因子 (GDNF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
生長分化因子 -3(GDF-3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat monocyte chemotactic protein 2 (MCP-2/CCL8) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒
Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit 人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶體
飲料甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseL-SelectinELISAKit小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD134重組兔單克隆抗體
20號染色體開放閱讀框107抗體
ABHD10重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標(biāo)簽) Protein
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1 0.5mgSocs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細(xì)胞激酶信號-1抑制劑(抗原)
CD55重組人 CD55 / DAF 蛋白 Protein
CD177 Protein Human 重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PDCD1 Protein Human 重組人 PD1 / PDCD1 蛋白
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1 0.5mgSocs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細(xì)胞激酶信號-1抑制劑(抗原)
CD177 Protein Human 重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ABHD10重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標(biāo)簽) Protein
PDCD1 Protein Human 重組人 PD1 / PDCD1 蛋白
CD55重組人 CD55 / DAF 蛋白 Protein
小鼠精原干細(xì)胞大鼠高密度脂蛋白(HDL-C)試劑盒 ,英文名: HDL-C ELISA Kit
Porcine ierleukin 1 alpha (IL-1 alpha) ELISA Kit 豬白介素1α(IL-1α)試劑盒
B組輪狀病毒(HRV-B)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMHCI/AgBI/H-1IELISAKit大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類
體液尿素比色法定量試劑盒20次
ELISAKitG6PD牛葡萄糖60酸脫氫酶
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