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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-11-04
小鼠表皮角化細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7513 |
細(xì)胞簡介:
小鼠表皮角化分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞(KC)是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分,在體內(nèi)處于不斷增殖過程中,分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層,少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移,細(xì)胞的分化程度逐漸增加,并喪失分裂活性。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬血管緊張素Ⅱ試劑盒 豬血管緊張素Ⅱ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬血管緊張素Ⅱ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬血管緊張素Ⅱ試劑盒、豬血管緊張素Ⅱeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬血管假血友病因子試劑盒 豬血管假血友病因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬血管假血友病因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬血管假血友病因子試劑盒、豬血管假血友病因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、豬心肌肌鈣蛋白Ⅰeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒、豬纖溶酶原激活物抑制因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒
Human maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)試劑盒
Rabbitp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 兔p53(p53)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANP(MouseAialNaiureticPeptide)ELISAKit小鼠心肽
血液半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20次
Porcinegrowthhormone,GHELISAKit豬生長激素(GH)試劑盒
HERC2 E3泛素蛋白連接酶抗體
微絲相關(guān)蛋白3抗體
DPP7重組小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
補(bǔ)體成分3(C3)重組蛋白 Recombinant Complement Component 3 (C3)
CBLC重組人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
BCL2L2 Protein Human 重組人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白
補(bǔ)體成分3(C3)重組蛋白 Recombinant Complement Component 3 (C3)
BCL2L2 Protein Human 重組人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DPP7重組小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白
CBLC重組人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠表皮角化細(xì)胞大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒 ,英文名: cAMP ELISA Kit
Rabbit maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/G 兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/G
腦膜奈瑟菌W135群(NM- W135)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白
體液還原型(GSH)濃度比色法定量試劑盒50次
ELISAKitPⅠNP人Ⅰ型原膠原N端前肽
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