服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
全國統(tǒng)一服務(wù)熱線：
15201736385
產(chǎn)品中心您當(dāng)前的位置：首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細胞 > 兔原代細胞 > 兔血管外膜成纖維細胞
基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔血管外膜成纖維細胞
產(chǎn)品簡介：
兔血管外膜成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：脂肪分解刺激脂蛋白受體抗體 Prader-Willi綜合征相關(guān)蛋白抗體 分選連接蛋白4抗體 兔胰腺星狀細胞 人肝竇內(nèi)皮細胞 NCI-H1048人小細胞肺癌細胞 HCT-8 [HRT-18] (人回盲腸癌細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：61
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔血管外膜成纖維細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
血管組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7110 |
細胞簡介：
兔血管外膜成纖維分離自血管外膜組織；血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主，當(dāng)血管受損傷時，成纖維細胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一，其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介：
公司實驗室分離的兔血管外膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的兔血管外膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 96T/48T
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)試劑盒 96T/48T
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T
兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 96T/48T
小鼠白三烯E4(LTE4)試劑盒 96T/48T
Rat heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒
HumanSeptokinase,SKELISAKit 人鏈激酶(SK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancaenorhabditiselegansdeathgene,CED-3試劑盒人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
質(zhì)粒/蛋白制備樣品內(nèi)毒素濁度法定量試劑盒20次
HumansolubleP-selectin，sP-selectinELISAKit人可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
CD134抗體
上皮鈉通道β抗體
LDLR重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原
ACOX1重組人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein
GAPDH Protein Human 重組人 GAPDH 蛋白
ICOSLG Protein Mouse 重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原
GAPDH Protein Human 重組人 GAPDH 蛋白
LDLR重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
ICOSLG Protein Mouse 重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
ACOX1重組人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein
兔血管外膜成纖維細胞大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)試劑盒 ，英文名： MMP13 ELISA Kit
Mouse cathepsin K (cath-K) ELISA Kit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒
RatvisfatinELISAKit 大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforF1+2(Rabbitprothrombinfragme1+2)ELISAKit兔原片段F1+2
細胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量試劑盒20次
Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit大鼠受體(M-AChR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
