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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-10-31
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔晶狀體上皮細(xì)胞
組織來源:晶狀體組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
兔晶狀體上皮分離自晶狀體組織;晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細(xì)胞分開;因而,晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾,又不受其它類型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染,保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中,晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長而變成晶狀體纖維細(xì)胞,并最終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。研究表明,晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控,包括表皮生長因子和胰島素等。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒 96T/48T
小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒 96T/48T
小鼠β甘露糖苷酶(βManase)試劑盒 96T/48T
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humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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SBNO1蛋白抗體
磷酸化叉頭蛋白家族1抗體
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LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
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Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA
F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白
BACE1重組小鼠 BACE-1 蛋白 Protein
CD38 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB3 蛋白
LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein
兔晶狀體上皮細(xì)胞大鼠酪酸3/色酸5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)試劑盒 ,英文名: YWHAζ ELISA Kit
Mouse inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒
RatParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforF-TESTOELISAKit大鼠游離睪同
細(xì)胞黑色素(MELANIN)染色試劑盒50次
RatprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒規(guī)格:96T/48T