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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-29
大鼠外周血白細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7105 |
細胞簡介:
大鼠外周血白分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞(Leukocyte),舊稱白血球,血液中的一類細胞。根據(jù)白細胞的細胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒,可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞,根據(jù)其特殊顆粒的染色特性,又分為中性粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞,白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到,血細胞中體積比較大、數(shù)量比較少,具有細胞核;其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠外周血白采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠外周血白經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人早期生長應答蛋白1(EGR1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human EGR1 (Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit
人早期生長應答蛋白2(EGR2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human EGR2 (Early Growth Response Protein 2) ELISA Kit
人早期生長應答蛋白3(EGR3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit
人早期生長應答蛋白4(EGR4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human EGR4 (Early Growth Response Protein 4) ELISA Kit
豚鼠白介素1β(IL1β)試劑盒 ,英文名: IL1β ELISA Kit
Human cholyglycine (CG) ELISA Kit 人甘膽酸(CG)試劑盒
rabbitLeptin,LEPELISAKit 兔子瘦素(LEP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAELISAKit大鼠抗受體
線粒體復合物III蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISAKit兔抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁?;M蛋白H3重組兔單克隆抗體
染色質(zhì)解旋酶DNA結合蛋白抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)
CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白
ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標簽)
PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)
ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標簽)
CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠外周血白細胞人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA 試劑盒
Human ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 人轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒
HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 人可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanIerleukin10,IL-10試劑盒人白介素10(IL-10)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織抗壞血酸比色法定量試劑盒20次
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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