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基礎信息Product information
產品名稱：
大鼠腎足突細胞
產品簡介：
大鼠腎足突細胞公司正在出售的產品：組織相容性抗原DP重組兔單克隆抗體 ESPNL蛋白抗體 氧化固醇結合蛋白8抗體 大鼠視網膜前體細胞 小鼠肺大靜脈內皮細胞 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞；NTERA-2 Mv.1.Lu [NBL-7; Mv1Lu] (貂肺上皮細胞)
產品型號：
廠商性質：經銷商
訪問量：75
更新時間：2024-10-29
產品特性Product characteristics
大鼠腎足突細胞
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7254 |
細胞簡介：
大鼠腎足突分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側，連同GBM和毛細血管內皮一起構成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置，使得其體內研究較為困難；又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養(yǎng)的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP），呈指狀交叉復蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發(fā)揮關鍵作用。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠腎足突采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠腎足突經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
人整合素連接激酶1(ILK-1)試劑盒 96T/48T
人整合素αⅤβ3(IegrinαⅤβ3)試劑盒 96T/48T
人真胰島素(TI)試劑盒 96T/48T
人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)試劑盒 96T/48T
豚鼠白介素6(IL-6)試劑盒 ，英文名： IL-6 ELISA Kit
Two dipeptidyl peptidase IV (DPP IV) ELISA Kit 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒
RabbitIerleukin1,IL-1ELISAKit 兔子白介素1(IL-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-EP(mouseBeta-Endorphin)ELISAKit小鼠β內啡肽
細菌亞鹽還原酶定性試劑盒20次
RabbitHaptoglobin,Hpt/HPELISAKit兔結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
成骨相關轉錄因子抗體
內核膜蛋白MAN1抗體
S100A2重組人 S100A2 蛋白 Protein
血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)重組蛋白 Recombinant Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
INHBB Protein Human 重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)重組蛋白 Recombinant Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
INHBB Protein Human 重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白
S100A2重組人 S100A2 蛋白 Protein
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
大鼠腎足突細胞人脂蛋白相關0脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒
Human tumor markers (CA724) ELISA Kit 人腫瘤標志物(CA724)試劑盒
HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanImmuneRNA,Irna試劑盒人免疫核糖核酸(Irna)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量試劑盒20次
HumanLeukoieneB4，LT-B4ELISAKit人白三烯B4(LTB4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
