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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-29
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠卵巢成纖維細(xì)胞
組織來源:卵巢組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠卵巢成纖維分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細(xì)胞大多分布于卵巢表面,其主要特點(diǎn)和功能:①成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng);②卵巢損傷后,成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢;③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴(kuò)散。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵巢成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵巢成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)試劑盒 96T/48T
小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)試劑盒 96T/48T
小鼠糖化白蛋白(GA)試劑盒 96T/48T
小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒 96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human thioredoxin (x) ELISA Kit 人硫氧化還原蛋白(x)試劑盒
Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3試劑盒雞壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞AIL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受體(ER)試劑盒規(guī)格:96T/48T
G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體
肌球蛋白重鏈抗體
HA重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PBEF (CT 0.5mgPBEF (CT) 內(nèi)脂素/B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子
EPHA7重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
CGREF1 Protein Human 重組人 CGREF1 蛋白
BSG Protein Human 重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PBEF (CT 0.5mgPBEF (CT) 內(nèi)脂素/B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子
CGREF1 Protein Human 重組人 CGREF1 蛋白
HA重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
BSG Protein Human 重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EPHA7重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒
Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)試劑盒
Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCrosslaps,Cr試劑盒人骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織DYRK1A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
humanProstaglandinF,PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
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