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更新時(shí)間:2024-11-05
大鼠卵泡基膜細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
卵巢 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8243 |
細(xì)胞簡介:
大鼠卵泡基膜(卵泡膜細(xì)胞)分離自卵巢組織;卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動(dòng)物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成,垂體素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞在垂體素的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細(xì)胞合成的雄激素透過基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞,并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に?。因此,卵泡膜?xì)胞在生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對(duì)于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動(dòng)物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類固醇激素生成的機(jī)制已見相關(guān)報(bào)道,但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡基膜采用先機(jī)械分離后膠原酶消化結(jié)合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡基膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠卵泡基膜體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素27(IL-27)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素23(IL-23)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌酸激酶(CK)試劑盒 96T/48T
Human myelin protein 2 (P2) ELISA Kit 人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)試劑盒
HumanLinkerforactivationofTcell,LATELISAKit 人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Ku-aibody試劑盒人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物彌散吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量試劑盒(包括萃取)20次
HumanVaricellazostervirusIgM,VZVIgMELISAKit人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
20號(hào)染色體開放閱讀框24抗體
磷酸化基質(zhì)重塑相關(guān)蛋白PARVA抗體
JAM2重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein
Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 0.5mgAnnexin A 膜粘連蛋白 A抗原
ADIPOQ重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白
CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
白細(xì)胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)重組蛋白 Recombinant Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2 (LAIR2)
EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白
RETN重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
REG1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MERTK重組人 MERTK / Mer (aa 578-872) 蛋白 Protein
大鼠卵泡基膜細(xì)胞大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 ,英文名: IL-8/CXCL8 ELISA Kit
Mouse ierleukin 13 (IL-13) ELISA Kit 小鼠白介素13(IL-13)試劑盒
ELISA 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍化營養(yǎng)因子(mouse GDNF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitfori-PTHELISAKit大鼠全段甲狀旁腺素
通用型非洲(Africanswinefevervirus;ACSF)試劑盒20次
ELISAKitLPL大鼠脂蛋白脂酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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