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訪問(wèn)量:705
更新時(shí)間:2024-11-05
大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
尾動(dòng)脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8267 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮分離自尾動(dòng)脈組織;尾動(dòng)脈是鼠尾的主要血管,尾部主要大血管分布表淺,尾側(cè)靜脈適于注射給藥,尾正中動(dòng)脈適于動(dòng)脈采血、練習(xí)顯微外科血管吻合技術(shù)等,實(shí)際應(yīng)用相當(dāng)普遍。許多動(dòng)物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富,供血來(lái)源于薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈兩個(gè)動(dòng)脈,形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結(jié)合的特點(diǎn),尾部淺層 3 套縱向動(dòng)靜脈系統(tǒng),鼠尾背側(cè)為不規(guī)則動(dòng)靜脈鏈狀結(jié)構(gòu),深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通,且呈動(dòng)靜脈血管徑不匹配的特點(diǎn)。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈。其在尾部依尾橫動(dòng)脈形成溝通。尾橫動(dòng)脈呈尾椎節(jié)段性分布,直接溝通尾正中動(dòng)脈、尾深動(dòng)脈和皮支。在尾部被橫斷后,可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動(dòng)靜脈回流通路; 鼠尾存在動(dòng)靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側(cè)靜脈明顯大于伴隨的動(dòng)脈,而正中動(dòng)脈明顯大于伴隨的靜脈,形成供血主要來(lái)自腹面的尾正中動(dòng),回血主要依靠?jī)蓚?cè)的尾側(cè)靜脈,符合腹面動(dòng)脈保護(hù)的安全性,同時(shí)利于血管散熱,尾橫動(dòng)脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻(xiàn)[王蕾,葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結(jié)構(gòu)與鼠尾的生理功能探討]。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠促卵泡素(FSH)試劑盒 96T/48T
小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒 96T/48T
小鼠促甲狀腺素(TSH)試劑盒 96T/48T
小鼠促黃體激素(LH)試劑盒 96T/48T
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human bactericidal peptide (cecropin) ELISA Kit 人殺菌肽(cecropin)試劑盒
HumancecropinELISAKit 人殺菌肽(cecropin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgA試劑盒人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物甲基化組蛋白H3-K9染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
Humanvoltage-gatedcalciumchannel,VGCCELISAKit人鈣離子通道抗體(VGCC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD74單克隆抗體
鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶激活蛋白1抗體
IL17A重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽 0.2mgNociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原)
CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
EMC8 Protein Human 重組人 EMC8 / COX4NB / NOC4 蛋白
SELP Protein Mouse 重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽 0.2mgNociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原)
EMC8 Protein Human 重組人 EMC8 / COX4NB / NOC4 蛋白
IL17A重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白 Protein
SELP Protein Mouse 重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠白介素26(IL-26)試劑盒 ,英文名: IL-26 ELISA Kit
Mouse leukoiene C4 (LTC4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒
ELISA 小鼠IgG(mouse IgG) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-9ELISAKit大鼠白介素9
通用型果膠生物酶比色法定量試劑盒20次
ELISAKitAChRab大鼠乙酰受體抗體