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更新時(shí)間:2024-11-05
人筋膜成纖維細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
筋膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8297 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人筋膜成纖維分離自筋膜組織;筋膜,解剖結(jié)構(gòu)名。指肌肉的堅(jiān)韌部分。附于骨節(jié)者為筋,包于肌腱外者為膜。是聯(lián)絡(luò)關(guān)節(jié)、肌肉,主 司運(yùn)動(dòng)的組織。為肝所主,并賴肝血的滋養(yǎng)。筋膜是一類結(jié)締組織,結(jié)締組織除了筋膜還有其他表現(xiàn)的形式,如腱、韌帶、腱膜和疤痕組織。在不同的地方結(jié)締組織也有著不同的名稱:腦和脊髓周圍的是腦膜;骨周圍是骨膜;心臟周圍是心包;腹腔內(nèi)表面的是腹膜;在皮下層包圍整個(gè)身體和封閉肌肉和肌群的叫筋膜。筋膜位于肌肉的表面,分為淺筋膜和深筋膜兩種。(1)淺筋膜位于皮下,又稱皮下筋膜,由疏 松結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)含有脂肪、淺靜脈、皮神經(jīng)以及淺淋巴結(jié)和淋巴管等。脂肪的多少因身體部位、性別和營(yíng)養(yǎng)狀況不同。臨床常作的皮 下注射,即將藥液注入淺筋膜內(nèi)。(2)深筋膜 位于淺筋膜深面,又稱固有筋膜,由致密結(jié)締組織構(gòu)成,遍于全身且互相連續(xù)。深筋膜包被 肌或肌群、腺體、大血管和神經(jīng)等形成筋膜鞘。四肢的深筋膜。伸入肌群之間與骨相連,分隔肌群,稱肌間隔。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織 的主要細(xì)胞成分,細(xì)胞呈梭形或扁的星狀,具有突起。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的人筋膜成纖維采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的人筋膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人筋膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒 96T/48T
兔子脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 96T/48T
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒 96T/48T
兔子孕激素/孕(PROG)試劑盒 96T/48T
小鼠補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒
HumanUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6試劑盒人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總糖蛋白樹脂法化試劑盒5次
HumanSeptokinase,SKELISAKit人鏈激酶(SK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
INTS1蛋白抗體
生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2抗體
IL17F重組大鼠 IL17F / IL-17F 蛋白 Protein
Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
FUT8 Protein Human 重組人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標(biāo)簽)
BST1 Protein Mouse 重組小鼠 CD157 / BST1 蛋白
Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
FUT8 Protein Human 重組人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標(biāo)簽)
IL17F重組大鼠 IL17F / IL-17F 蛋白 Protein
BST1 Protein Mouse 重組小鼠 CD157 / BST1 蛋白
KDR重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
人筋膜成纖維細(xì)胞大鼠白介素11(IL-11)試劑盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit
Mouse compleme 1 inhibitor aibody (C1INH) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒
ELISA 小鼠瘦素受體(mouse Leptin receptor) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-27(humanIerleukin27)ELISAKit人白介素27
通用型精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitPDGF-AB大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB