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更新時間:2024-11-05
人口腔角質形成細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
口腔 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8298 |
細胞簡介:
人口腔角質形成分離自口腔組織;口腔黏膜在組織學形態(tài)上分為上皮、固有層和黏膜下層;口腔黏膜上皮細胞按是否參與角化被分為角質形成細胞與非角質形成細胞,主要由角質形成細胞構成;前者組成復層鱗狀上皮,后者游離分布于上皮層內。根據(jù)在口腔內部位的不同,復層鱗狀上皮可分為角化、不全角化或無角化型等幾類。以角化型上皮為例,由上皮的深面至淺面可分為基層、棘層、粒層及角化層等四層。
方法簡介:
實驗室分離的人口腔角質形成采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的人口腔角質形成經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,含FBS、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人口腔角質形成體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
乙醇酸氧化酶測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
錳過氧化物酶(MnP)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 100管/96樣
鴨子β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒
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CLIAKitforACV-AELISAKit大鼠活化素A
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MouseProinsulin,PIELISAKit小鼠胰島素原(PI)試劑盒
JmjC結構域組蛋白去甲基化酶H3-K36抗體
視網膜母細胞瘤結合蛋白8抗體
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Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)
PDE2A重組人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 標簽) Protein
CALM2 Protein Human 重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標簽)
NGFR Protein Mouse 重組小鼠 NGFR / P75 蛋白
Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha 0.5mgInsulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)
CALM2 Protein Human 重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標簽)
ACVR2B重組食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (His 標簽) Protein
NGFR Protein Mouse 重組小鼠 NGFR / P75 蛋白
PDE2A重組人 PDE2A / CGS-PDE 蛋白 (aa 215-900, His 標簽) Protein
人口腔角質形成細胞大鼠白介素10(IL-10)試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
Rabbit collagenase I (Collagenase I) ELISA Kit 兔子膠原酶I(Collagenase I)試劑盒
ELISA 小鼠促黃體生成激素(mouse LH) 進口分裝
CLIAKitforIL-27ELISAKit大鼠白介素27
通用型精(arginine)含量化學比色法定量試劑盒20次
ELISAKitPDGF大鼠血小板衍生生長因子
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行