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更新時間:2024-11-04
小鼠視網膜前體細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
視網膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7570 |
細胞簡介:
小鼠視網膜前體分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。層叫雙節(jié)細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠視網膜前體采用消化法結合專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠視網膜前體經Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒、小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒、小鼠致癌基因相關蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠脂聯素試劑盒 小鼠脂聯素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠脂聯素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠脂聯素試劑盒、小鼠脂聯素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠脂蛋白試劑盒 小鼠脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠脂蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠脂蛋白試劑盒、小鼠脂蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)試劑盒 96T/48T
Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)試劑盒
Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶
飲料比色法定量試劑盒20次
MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒規(guī)格:96T/48T
癌胚抗原單克隆抗體(檢測)
piwi樣2蛋白抗體
CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標簽) Protein
GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉運蛋白3抗原
RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein
CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標簽)
CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)
GLUT3(Glucose transporter 3 0.5mgGLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉運蛋白3抗原
CD247 Protein Human 重組人 CD247 / CD3-ZETA 蛋白 (GST 標簽)
CDH15重組大鼠 Cadherin-15 / CDH15 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)
RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein
小鼠視網膜前體細胞大鼠多巴胺(DA)試劑盒 ,英文名: DA ELISA Kit
Porcine heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒
馬特定基因序列(Hor)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLTC4(MouseLeukoieneC4)ELISAKit小鼠白三烯C4
體液總巰基含量熒光定量試劑盒20次
ELISAKitADM雞腎上腺髓質素
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