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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-05
兔小梁網(wǎng)細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
眼球 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8453 |
細胞簡介:
兔小梁網(wǎng)分離自眼球組織;小梁網(wǎng)由角膜基質(zhì)纖維、后界膜和角膜內(nèi)皮向后擴展而成,覆蓋在鞏膜靜脈竇的內(nèi)側(cè)。小梁網(wǎng)細胞在眼內(nèi)壓調(diào)節(jié)中起著關鍵作用;小梁網(wǎng)細胞內(nèi)有特定的神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)肽受體,其中包括腎上腺素、乙酰和神經(jīng)肽Y。青光眼是由于眼內(nèi)壓力升高而造成的一種逆致盲眼病,小梁網(wǎng)細胞的體外培養(yǎng)是青光眼病因?qū)W研究的重要手段之一。在小梁網(wǎng)細胞中,一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細胞內(nèi)信號傳導機制,小梁網(wǎng)細胞可合成不同類型的細胞外基質(zhì)蛋白以及金屬蛋白酶。形態(tài)學觀察可見,剛從組織塊長出的原代細胞,形態(tài)各異,多數(shù)呈星狀或不規(guī)則形。細胞有胞突,核橢圓形,胞體肥大,胞漿豐富,且可見吞噬顆粒。隨著細胞的增生及相互融合為單層,細胞的形態(tài)趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失,排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規(guī)則形。胞體透亮,包膜清晰。
方法簡介:
實驗室分離的兔小梁網(wǎng)采用組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔小梁網(wǎng)經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔小梁網(wǎng)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠白介素6(IL-6)試劑盒
豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒
豚鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒
前列腺素F2a/PGF2 α抗體
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPδ抗體
CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein
CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細胞趨化蛋白5抗原
UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein
FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白
CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標僀?
CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細胞趨化蛋白5抗原
FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白
CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein
CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標簽)
UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)試劑盒
Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循環(huán)免疫復合物(CIC)pcr檢測試劑盒分裝
Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20次
HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔小梁網(wǎng)細胞大鼠血小板反應蛋白(THBS1)試劑盒 ,英文名: THBS1 ELISA Kit
Mouse coisol (Coisol) ELISA Kit 小鼠(Coisol)試劑盒
MouseUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHumanchemerinELISAKit人chemerin
細胞CHK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitsIgA大鼠分泌型免疫球蛋白A
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行