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更新時間:2024-11-05
兔子宮頸上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
子宮 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8485 |
細胞簡介:
兔子宮頸上皮分離自子宮頸組織;子宮頸位于子宮下部,近似圓錐體,上端與子宮體相連,下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分:宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,其上端通過宮頸內口與子宮腔相連,其下端通過宮頸外口開口于陰道。內外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內分泌狀態(tài)等而變化;宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病,包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題,體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的兔子宮頸上皮采用膠原酶消化法,結合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的tu子宮頸上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔子宮頸上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠抗肌內膜抗體IgA(EMAIgA)ELISAKit ELISA
小鼠鐵蛋白(FE)ELISAKit ELISA
小鼠酶2(CA-2)ELISAKit ELISA
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit ELISA
PALM3抗體
卷曲螺旋結構域蛋白90B抗體
PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)
KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein
CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白
CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標簽)
Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)
CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白
PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標簽)
KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA pcr檢測試劑盒
Human tetanus aibody (Tetanus Ab) ELISA Kit 人破傷風抗體(Tetanus Ab)試劑盒
Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISAKit 人脂肪酸結合蛋白(FABP)pcr檢測試劑盒分裝
HumanAcetylcholinesterase,AChE試劑盒人乙酰酯酶(AChE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
正常人體腎組織S9組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子宮頸上皮細胞大鼠硫氧還蛋白還原酶1(xR1)試劑盒 ,英文名: xR1 ELISA Kit
Mouse proinsulin (PI) ELISA Kit 小鼠胰島素原(PI)試劑盒
RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGDH/GLDH(HumanGlamatedehydrogenase)ELISAKit人谷脫氫酶
細胞元素熒光定量試劑盒20次
RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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